Hệ thống kháng nguyên – kháng thể anti-Ro/SSA và anti-La/SSB

Các tự kháng thể hướng tới các tự kháng nguyên Ro/ЅSA và La/ЅSB ban đầu được xác định ở bệnh nhân mắc bệnh Sjögren (SjD) và lupus ban đỏ hệ thống (SLE). Các nghiên cứu tiếp theo cho thấy kháng thể anti-Ro/ЅЅA có thể có mặt ở bệnh nhân mắc các bệnh tự miễn khác, bao gồm xơ cứng hệ thống (SSc), bệnh cơ viêm vô căn (IIM), bệnh phổi kẽ (ILD), bệnh mô liên kết hỗn hợp (MCTD), viêm đường mật nguyên phát (PBC; trước đây được gọi là xơ gan đường mật nguyên phát), và viêm khớp dạng thấp (RA). Kháng thể anti-Ro/SЅA có thể là tự kháng thể duy nhất có mặt ở một nhóm bệnh nhân SLE âm tính kháng thể nhân (ANA). Ngoài ra, kháng thể anti-Ro/SЅA (có hoặc không có kháng thể anti-La/SЅB) giúp xác định phụ nữ mang thai có nguy cơ cao sinh con mắc lupus sơ sinh (NL). (Xem “Lupus sơ sinh: Dịch tễ học, sinh bệnh, biểu hiện lâm sàng và chẩn đoán”.)

Các hệ kháng thể anti-Ro/SЅA và anti-La/SSB cùng ý nghĩa lâm sàng của các kháng thể này được xem xét tại đây. Tổng quan về các ANA quan trọng trong SLE và các bệnh tự miễn liên quan, cũng như ý nghĩa lâm sàng của các tự kháng thể hướng tới axit deoxyribonucleic chuỗi kép (dsDNA), ribonucleoprotein U1 (RNP), Sm, và protein P ribosome được xem xét riêng:

Huyết thanh chứa tự kháng thể hướng vào kháng nguyên Ro/ЅЅA có thể nhận diện một hoặc cả hai protein tế bào với trọng lượng phân tử khoảng 52 và 60 kD 1-4. Các tự kháng nguyên này được gọi lần lượt là “Ro52” và “Ro60”. Ro52 và Ro60 không có sự tương đồng trình tự axit amin; tự kháng thể hướng vào Ro52 không phản ứng chéo với Ro60, và ngược lại. Mặc dù ban đầu người ta nghĩ rằng hai tự kháng nguyên này tương tác với nhau, các nghiên cứu sau này đã chỉ ra rằng hai protein này cư trú ở các ngăn tế bào riêng biệt: Ro60 định vị trong nhân và nhân con, trong khi Ro52 định vị trong tế bào chất.

Ro52 tương tác với nhiều loại cơ chất và có thể tăng cường hoặc ức chế chức năng của các protein mục tiêu. Nó liên kết với phần Fc của các phân tử immunoglobulin G (IgG) thông qua miền B30.2 ở đầu C, và xúc tác quá trình polyubiquitin hóa IgG bị gấp sai, từ đó đẩy nhanh sự phân hủy của nó trong proteasome 8,9. Sự hiện diện của một miền có thể liên kết với phần Fc của các phân tử kháng thể làm dấy lên khả năng Ro52 đóng vai trò trong “miễn dịch kháng thể nội bào.” Các hạt virus được bao phủ bởi kháng thể có thể được mang vào bên trong tế bào trong quá trình nhiễm trùng. Tương tác giữa Ro52 và phức hợp kháng thể-mầm bệnh có thể dẫn đến quá trình ubiquitination và sau đó là sự phân hủy của mầm bệnh 10.

Ro52 cũng có thể có vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh viêm. Ro52 thêm một phân tử ubiquitin vào chất ức chế kinase tiểu đơn vị beta của yếu tố nhân kappa-B hoạt hóa (IKKB) và điều chỉnh giảm tín hiệu yếu tố nhân kappa-B (NFKB) tiền viêm 11. Ro52 cũng ức chế viêm bằng cách nhắm mục tiêu các yếu tố điều hòa interferon (IRF) 3 và 7 để phân hủy qua trung gian ubiquitin 12,13. Phù hợp với tác động của Ro52 lên tín hiệu NFKB và độ ổn định của IRF, chuột thiếu Ro52 phát triển bệnh tự miễn dịch đặc trưng bởi tăng globulin máu và bệnh thận 14,15.

Ro52, giống như Ro60 và La (xem ‘kháng nguyên La/SSB’ dưới đây), cũng có thể đóng vai trò trong việc điều chỉnh độ ổn định của mRNA. Ro52 tương tác và tăng cường hoạt động của protein decapping (DCP) 2 16, một protein loại bỏ mũ 5′ khỏi các phân tử mRNA. Việc loại bỏ mũ 5′ làm lộ các phân tử mRNA cho sự phân hủy bởi exoribonuclease I.

Các tự kháng thể nhắm vào kháng nguyên tự thân La/SЅB (La) tương tác với một protein 47-kD, protein này di chuyển giữa nhân và tế bào chất nhưng chủ yếu được tìm thấy trong nhân 17. Một DNA bổ sung (cDNA) mã hóa La đã được xác định vào năm 1988 18. Phần N-terminus của protein chứa một miền liên kết RNA “La” và một motif nhận dạng RNA (RRM) liền kề, chúng hợp tác để liên kết với RNA. Phần C-terminus của protein chứa một RRM thứ hai theo sau là một motif cơ bản ngắn (“miền SBF”) và một trình tự định vị nhân 19. Phần N-terminal của La điều chỉnh sự tương tác với đầu 3′ của các bản ghi polymerase RNA III 20. La tham gia vào quá trình xử lý các RNA không mã hóa nhỏ, chẳng hạn như RNA 5S ribosome.

La cũng liên kết với tRNA chuyển hóa tế bào (t), cũng như các phân tử RNA virus, bao gồm những phân tử được sản xuất bởi virus Epstein-Barr (EBV), virus Viêm gan A và C, virus hợp bào hô hấp, adenovirus và virus suy giảm miễn dịch ở người (HIV) 17,21-25. La có thể điều chỉnh quá trình dịch mã của các RNA virus bằng cách tăng cường chức năng vị trí vào ribosome nội bộ. Một báo cáo cho thấy La có vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh nhiễu xạ RNA (RNAi) bằng cách tăng cường sự luân chuyển RNAi trong phức hợp làm im lặng do RNA gây ra (RISC) 26, cho thấy La có vai trò trong việc điều chỉnh sự ổn định và dịch mã của mRNA thông tin. Chưa có báo cáo nào về mô hình chuột thiếu protein La.

Với việc nhận thấy kháng tự kháng nguyên được chỉ định là “Ro” bao gồm hai protein riêng biệt (Ro60 và Ro52), các xét nghiệm miễn dịch pha rắn đã được phát triển cho từng loại 31. Tuy nhiên, nhiều phòng thí nghiệm thương mại sử dụng một xét nghiệm kháng thể “anti-Ro” duy nhất cho cả kháng thể anti-Ro60 và anti-Ro52 bằng cách sử dụng sự kết hợp của hai kháng nguyên, mặc dù thông tin lâm sàng khác nhau được cung cấp bởi việc phát hiện riêng lẻ kháng thể tự kháng Ro-60 và anti-Ro52 (xem ‘Ý nghĩa lâm sàng’ bên dưới). Ngoài ra, các xét nghiệm kết hợp kháng nguyên Ro52 và Ro60 có thể không phát hiện được tới 20 phần trăm bệnh nhân có kháng thể chống lại Ro52 hoặc Ro60 31.

Bởi vì kháng thể tự thân anti-Ro tương đối đặc hiệu với SjD, một Nhóm Đồng thuận Mỹ-Châu Âu đã đưa sự hiện diện của kháng thể anti-Ro có hoặc không có kháng thể anti-La là một trong sáu tiêu chí phân loại cho bệnh này 45. Hệ thống phân loại sau đó của Học viện Thấp khớp học Hoa Kỳ (ACR)/Liên minh Châu Âu về Thấp khớp học (EULAR; trước đây được biết đến là Liên đoàn Châu Âu Chống Thấp khớp) cho SjD nguyên phát đã nhấn mạnh hơn nữa sự hiện diện của kháng thể anti-Ro. (Xem “Chẩn đoán và phân loại bệnh Sjögren”, phần ‘Tiêu chí phân loại’.)

Loại kháng thể anti-Ro (ví dụ: anti-Ro52 so với anti-Ro60) được phát hiện trong huyết thanh của bệnh nhân có thể có ý nghĩa lâm sàng. Ở bệnh nhân SjD, anti-Ro60 và anti-Ro52 được phát hiện ở 67 và 75 phần trăm cá nhân bị ảnh hưởng; sự hiện diện của kháng thể anti-Ro52 có thể liên quan đến bệnh nặng hơn 35 và sự phát triển của ILD 36.

Như đã mô tả ở trên, huyết thanh chỉ có kháng thể tự thân anti-Ro60 và/hoặc anti-Ro52 có thể được báo cáo là “âm ANA” (xem ‘Nhuộm miễn dịch huỳnh quang trên cơ chất HEp-2’ ở trên). Khi đánh giá bệnh nhân nghi ngờ mắc SLE nhưng lại âm ANA bằng phương pháp miễn dịch huỳnh quang gián tiếp, điều quan trọng là phải yêu cầu xét nghiệm kháng thể anti-Ro bằng phương pháp pha rắn 46. (Xem ‘Nhuộm miễn dịch huỳnh quang trên cơ chất HEp-2’ ở trên và “Lupus ban đỏ hệ thống ở người lớn: Biểu hiện lâm sàng và chẩn đoán”, phần ‘SLE âm ANA’.)

Biến chứng nghiêm trọng nhất, mặc dù hiếm gặp, của NL ở trẻ sơ sinh là block tim hoàn toàn. Một số bà mẹ không triệu chứng có kháng thể anti-Ro (có hoặc không có kháng thể anti-La) cuối cùng có thể phát triển một bệnh tự miễn liên quan. Dịch tễ học, sinh bệnh học và các đặc điểm lâm sàng của NL, theo dõi tiền sản block tim trong bối cảnh kháng thể anti-Ro/SSA của mẹ, và quản lý block tim hoàn toàn bẩm sinh được trình bày riêng. (Xem “Lupus sơ sinh: Dịch tễ học, sinh bệnh học, biểu hiện lâm sàng và chẩn đoán” và “Block nhĩ thất độ ba (hoàn toàn) bẩm sinh”.)

Việc quyết định thực hiện xét nghiệm kháng thể anti-Ro và anti-La, sử dụng phương pháp xét nghiệm pha rắn, phụ thuộc vào bối cảnh lâm sàng. Các bệnh nhân có thể được chỉ định xét nghiệm kháng thể anti-Ro và anti-La bao gồm:

1. Deutscher SL, Harley JB, Keene JD. Molecular analysis of the 60-kDa human Ro ribonucleoprotein. Proc Natl Acad Sci U S A 1988; 85:9479.
2. Ben-Chetrit E, Gandy BJ, Tan EM, Sullivan KF. Isolation and characterization of a cDNA clone encoding the 60-kD component of the human SS-A/Ro ribonucleoprotein autoantigen. J Clin Invest 1989; 83:1284.
3. Chan EK, Hamel JC, Buyon JP, Tan EM. Molecular definition and sequence motifs of the 52-kD component of human SS-A/Ro autoantigen. J Clin Invest 1991; 87:68.
4. Wada K, Kamitani T. Autoantigen Ro52 is an E3 ubiquitin ligase. Biochem Biophys Res Commun 2006; 339:415.
5. Verhagen AP, Pruijn GJ. Are the Ro RNP-associated Y RNAs concealing microRNAs? Y RNA-derived miRNAs may be involved in autoimmunity. Bioessays 2011; 33:674.
6. Fuchs G, Stein AJ, Fu C, et al. Structural and biochemical basis for misfolded RNA recognition by the Ro autoantigen. Nat Struct Mol Biol 2006; 13:1002.
7. Xue D, Shi H, Smith JD, et al. A lupus-like syndrome develops in mice lacking the Ro 60-kDa protein, a major lupus autoantigen. Proc Natl Acad Sci U S A 2003; 100:7503.
8. Keeble AH, Khan Z, Forster A, James LC. TRIM21 is an IgG receptor that is structurally, thermodynamically, and kinetically conserved. Proc Natl Acad Sci U S A 2008; 105:6045.
9. Takahata M, Bohgaki M, Tsukiyama T, et al. Ro52 functionally interacts with IgG1 and regulates its quality control via the ERAD system. Mol Immunol 2008; 45:2045.
10. Chan EKL. Anti-Ro52 Autoantibody Is Common in Systemic Autoimmune Rheumatic Diseases and Correlating with Worse Outcome when Associated with interstitial lung disease in Systemic Sclerosis and Autoimmune Myositis. Clin Rev Allergy Immunol 2022; 63:178.
11. Wada K, Niida M, Tanaka M, Kamitani T. Ro52-mediated monoubiquitination of IKK{beta} down-regulates NF-{kappa}B signalling. J Biochem 2009; 146:821.
12. Higgs R, Ní Gabhann J, Ben Larbi N, et al. The E3 ubiquitin ligase Ro52 negatively regulates IFN-beta production post-pathogen recognition by polyubiquitin-mediated degradation of IRF3. J Immunol 2008; 181:1780.
13. Higgs R, Lazzari E, Wynne C, et al. Self protection from anti-viral responses–Ro52 promotes degradation of the transcription factor IRF7 downstream of the viral Toll-Like receptors. PLoS One 2010; 5:e11776.
14. Espinosa A, Dardalhon V, Brauner S, et al. Loss of the lupus autoantigen Ro52/Trim21 induces tissue inflammation and systemic autoimmunity by disregulating the IL-23-Th17 pathway. J Exp Med 2009; 206:1661.
15. Bolland S, Garcia-Sastre A. Vicious circle: systemic autoreactivity in Ro52/TRIM21-deficient mice. J Exp Med 2009; 206:1647.
16. Yamochi T, Ohnuma K, Hosono O, et al. SSA/Ro52 autoantigen interacts with Dcp2 to enhance its decapping activity. Biochem Biophys Res Commun 2008; 370:195.
17. Fok V, Friend K, Steitz JA. Epstein-Barr virus noncoding RNAs are confined to the nucleus, whereas their partner, the human La protein, undergoes nucleocytoplasmic shuttling. J Cell Biol 2006; 173:319.
18. Chambers JC, Kenan D, Martin BJ, Keene JD. Genomic structure and amino acid sequence domains of the human La autoantigen. J Biol Chem 1988; 263:18043.
19. Alfano C, Sanfelice D, Babon J, et al. Structural analysis of cooperative RNA binding by the La motif and central RRM domain of human La protein. Nat Struct Mol Biol 2004; 11:323.
20. Teplova M, Yuan YR, Phan AT, et al. Structural basis for recognition and sequestration of UUU(OH) 3' temini of nascent RNA polymerase III transcripts by La, a rheumatic disease autoantigen. Mol Cell 2006; 21:75.
21. Bitko V, Musiyenko A, Bayfield MA, et al. Cellular La protein shields nonsegmented negative-strand RNA viral leader RNA from RIG-I and enhances virus growth by diverse mechanisms. J Virol 2008; 82:7977.
22. Honda M, Shimazaki T, Kaneko S. La protein is a potent regulator of replication of hepatitis C virus in patients with chronic hepatitis C through internal ribosomal entry site-directed translation. Gastroenterology 2005; 128:449.
23. Pudi R, Abhiman S, Srinivasan N, Das S. Hepatitis C virus internal ribosome entry site-mediated translation is stimulated by specific interaction of independent regions of human La autoantigen. J Biol Chem 2003; 278:12231.
24. Cordes S, Kusov Y, Heise T, Gauss-Müller V. La autoantigen suppresses IRES-dependent translation of the hepatitis A virus. Biochem Biophys Res Commun 2008; 368:1014.
25. Inoue Y, Sato H, Fujita K, et al. Selective translation of the measles virus nucleocapsid mRNA by la protein. Front Microbiol 2011; 2:173.
26. Liu Y, Tan H, Tian H, et al. Autoantigen La promotes efficient RNAi, antiviral response, and transposon silencing by facilitating multiple-turnover RISC catalysis. Mol Cell 2011; 44:502.
27. Pollock W, Toh BH. Routine immunofluorescence detection of Ro/SS-A autoantibody using HEp-2 cells transfected with human 60 kDa Ro/SS-A. J Clin Pathol 1999; 52:684.
28. Fritzler MJ, Hanson C, Miller J, Eystathioy T. Specificity of autoantibodies to SS-A/Ro on a transfected and overexpressed human 60 kDa Ro autoantigen substrate. J Clin Lab Anal 2002; 16:103.
29. Bonroy C, Vercammen M, Fierz W, et al. Detection of antinuclear antibodies: recommendations from EFLM, EASI and ICAP. Clin Chem Lab Med 2023; 61:1167.
30. Vercammen M, Bonroy C, Broeders S, et al. Analytical aspects of the antinuclear antibody test by HEp-2 indirect immunofluorescence: EFLM report on an international survey. Clin Chem Lab Med 2023; 61:1199.
31. Schulte-Pelkum J, Fritzler M, Mahler M. Latest update on the Ro/SS-A autoantibody system. Autoimmun Rev 2009; 8:632.
32. Gunnarsson R, El-Hage F, Aaløkken TM, et al. Associations between anti-Ro52 antibodies and lung fibrosis in mixed connective tissue disease. Rheumatology (Oxford) 2016; 55:103.
33. Sclafani A, D'Silva KM, Little BP, et al. Presentations and outcomes of interstitial lung disease and the anti-Ro52 autoantibody. Respir Res 2019; 20:256.
34. Reveille JD, Solomon DH, Schur PH, Kavanaugh A. Evidence based guidelines for the use of immunologic laboratory tests: Anti-Ro (SS-A) and La (SS-B). Arthritis Care Res 2013; in press.
35. Retamozo S, Akasbi M, Brito-Zerón P, et al. Anti-Ro52 antibody testing influences the classification and clinical characterisation of primary Sjögren's syndrome. Clin Exp Rheumatol 2012; 30:686.
36. Buvry C, Cassagnes L, Tekath M, et al. Anti-Ro52 antibodies are a risk factor for interstitial lung disease in primary Sjögren syndrome. Respir Med 2020; 163:105895.
37. Marie I, Hatron PY, Dominique S, et al. Short-term and long-term outcome of anti-Jo1-positive patients with anti-Ro52 antibody. Semin Arthritis Rheum 2012; 41:890.
38. Wodkowski M, Hudson M, Proudman S, et al. Monospecific anti-Ro52/TRIM21 antibodies in a tri-nation cohort of 1574 systemic sclerosis subjects: evidence of an association with interstitial lung disease and worse survival. Clin Exp Rheumatol 2015; 33:S131.
39. Lee AYS, Putty T, Lin MW, et al. Isolated anti-Ro52 identifies a severe subset of Sjögren's syndrome patients. Front Immunol 2023; 14:1115548.
40. Franceschini F, Cavazzana I. Anti-Ro/SSA and La/SSB antibodies. Autoimmunity 2005; 38:55.
41. Izmirly PM, Kim MY, Llanos C, et al. Evaluation of the risk of anti-SSA/Ro-SSB/La antibody-associated cardiac manifestations of neonatal lupus in fetuses of mothers with systemic lupus erythematosus exposed to hydroxychloroquine. Ann Rheum Dis 2010; 69:1827.
42. Llanos C, Izmirly PM, Katholi M, et al. Recurrence rates of cardiac manifestations associated with neonatal lupus and maternal/fetal risk factors. Arthritis Rheum 2009; 60:3091.
43. Nardi N, Brito-Zerón P, Ramos-Casals M, et al. Circulating auto-antibodies against nuclear and non-nuclear antigens in primary Sjögren's syndrome: prevalence and clinical significance in 335 patients. Clin Rheumatol 2006; 25:341.
44. Baer AN, McAdams DeMarco M, Shiboski SC, et al. The SSB-positive/SSA-negative antibody profile is not associated with key phenotypic features of Sjögren's syndrome. Ann Rheum Dis 2015; 74:1557.
45. Vitali C, Bombardieri S, Jonsson R, et al. Classification criteria for Sjögren's syndrome: a revised version of the European criteria proposed by the American-European Consensus Group. Ann Rheum Dis 2002; 61:554.
46. Pourmand N, Blomberg S, Rönnblom L, et al. Ro 52kD autoantibodies are detected in a subset of ANA-negative sera. Scand J Rheumatol 2000; 29:116.
47. Biazar C, Sigges J, Patsinakidis N, et al. Cutaneous lupus erythematosus: first multicenter database analysis of 1002 patients from the European Society of Cutaneous Lupus Erythematosus (EUSCLE). Autoimmun Rev 2013; 12:444.
48. Paz ML, González Maglio DH, Pino M, et al. Anti-ribonucleoproteins autoantibodies in patients with systemic autoimmune diseases. Relation with cutaneous photosensitivity. Clin Rheumatol 2011; 30:209.
49. Muratori L, Granito A, Muratori P, et al. Antimitochondrial antibodies and other antibodies in primary biliary cirrhosis: diagnostic and prognostic value. Clin Liver Dis 2008; 12:261.
50. Granito A, Muratori P, Muratori L, et al. Antibodies to SS-A/Ro-52kD and centromere in autoimmune liver disease: a clue to diagnosis and prognosis of primary biliary cirrhosis. Aliment Pharmacol Ther 2007; 26:831.
51. Takada K, Suzuki K, Matsumoto M, et al. Primary biliary cirrhosis in female subjects with sicca-associated antibodies. Mod Rheumatol 2007; 17:486.
52. Cavazzana I, Franceschini F, Quinzanini M, et al. Anti-Ro/SSA antibodies in rheumatoid arthritis: clinical and immunologic associations. Clin Exp Rheumatol 2006; 24:59.
53. Schneeberger E, Citera G, Heredia M, Maldonado Cocco J. Clinical significance of anti-Ro antibodies in rheumatoid arthritis. Clin Rheumatol 2008; 27:517.
54. Matsudaira R, Tamura N, Sekiya F, et al. Anti-Ro/SSA antibodies are an independent factor associated with an insufficient response to tumor necrosis factor inhibitors in patients with rheumatoid arthritis. J Rheumatol 2011; 38:2346.
55. Nayebirad S, Mohamadi A, Yousefi-Koma H, et al. Association of anti-Ro52 autoantibody with interstitial lung disease in autoimmune diseases: a systematic review and meta-analysis. BMJ Open Respir Res 2023; 10.
56. Arbuckle MR, McClain MT, Rubertone MV, et al. Development of autoantibodies before the clinical onset of systemic lupus erythematosus. N Engl J Med 2003; 349:1526.
57. Theander E, Jonsson R, Sjöström B, et al. Prediction of Sjögren's Syndrome Years Before Diagnosis and Identification of Patients With Early Onset and Severe Disease Course by Autoantibody Profiling. Arthritis Rheumatol 2015; 67:2427.